實(shí)驗(yàn)方法原理

二倍體細(xì)胞來源體內(nèi)二倍體細(xì)胞，也即正常細(xì)胞的初代培養(yǎng)。初代培養(yǎng)細(xì)胞成功后能始終保持二倍體細(xì)胞性狀，便成為二倍體細(xì)胞培養(yǎng)。
二倍體細(xì)胞雖不難培養(yǎng)，但欲求長(zhǎng)期呈旺盛地增殖生長(zhǎng)、并保持二倍體細(xì)胞性狀，亦非易事。為此必須采取一些有效的措施，一是低溫凍存，二是妥善的培養(yǎng)方法。
用反復(fù)傳代的方法以求獲得大量細(xì)胞和維持細(xì)胞長(zhǎng)期生存的辦法是不妥的。因在反復(fù)傳代中，難免由于培養(yǎng)條件的變化和其它不利影響，使細(xì)胞生物學(xué)性狀發(fā)生變化。隨時(shí)間延長(zhǎng)不僅能導(dǎo)致細(xì)胞停止生長(zhǎng)，并可失掉二倍體性狀或發(fā)生轉(zhuǎn)化。

實(shí)驗(yàn)步驟

二倍體細(xì)胞培養(yǎng)方法與一般培養(yǎng)相同，關(guān)鍵在于傳代，其傳代程序?yàn)?br class="sysbr" style="box-sizing: border-box; display: inline;"/>

1. 吸除舊培養(yǎng)液注入另瓶中；

2. 用BSS沖洗1 次；

3. 用0.25%胰蛋白酶消化，加入消化液量以僅覆蓋住細(xì)胞層即可；作用1~5 分鐘；

4. 待細(xì)胞附著松動(dòng)、細(xì)胞質(zhì)邊緣卷起和間隔加大，便終止消化；為防止細(xì)胞丟失可不必再用BSS沖洗，直接向瓶中加入培養(yǎng)液（新舊培養(yǎng)液按2：1）新舊混合；

5. 輕輕反復(fù)吹打制成單個(gè)細(xì)胞懸液（消化不足或吹打不充分，易形成細(xì)胞團(tuán)，不利于生長(zhǎng)，應(yīng)注意避免）；

6. 按一分為二比例接種培養(yǎng)。

Ausbian®特級(jí)胎牛血清所有血清出廠前，均經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)控，每個(gè)批次附有詳細(xì)完整的《檢測(cè)報(bào)告》，包括：品名，貨號(hào)，批號(hào)，血源地，生產(chǎn)日期，保質(zhì)期，pH值、滲透壓、血紅蛋白、總蛋白、球蛋白、IgG、內(nèi)毒素、無菌檢查（細(xì)菌、真菌、支原體）、病毒檢查（如BVD、牛腺病毒、細(xì)胞病變效應(yīng)等）、促細(xì)胞生長(zhǎng)能力、細(xì)胞毒性、BVD-1/2抗體檢查等。

實(shí)驗(yàn)人對(duì)于新批次血清，應(yīng)認(rèn)真審閱《檢測(cè)報(bào)告》，做好試用前篩選第一步。（如何看懂《檢測(cè)報(bào)告》，可登陸“締一生物"網(wǎng)站，留言技術(shù)部，得到免費(fèi)幫助。）

它在國(guó)內(nèi)市場(chǎng)經(jīng)歷十幾年，被眾多科研工業(yè)客戶反復(fù)選擇，也是細(xì)胞典藏等重大項(xiàng)目十幾年的供應(yīng)品牌